Kun suoritetaan sininen valkoinen näyttö valkoiset bakteeripesäkkeet sisältävät?
Kun suoritetaan sininen valkoinen näyttö valkoiset bakteeripesäkkeet sisältävät?

Video: Kun suoritetaan sininen valkoinen näyttö valkoiset bakteeripesäkkeet sisältävät?

Video: Kun suoritetaan sininen valkoinen näyttö valkoiset bakteeripesäkkeet sisältävät?
Video: 24 Tuntia puhdasta valkoista näyttöä HD, FULL HD, 2D, 3D, 4D! 2024, Marraskuu
Anonim

Päinvastoin, valkoisia pesäkkeitä ei pysty metaboloimaan X-Gal:ia tuottamaan sininen väriä, koska ne eivät tuota toiminnallista β-galaktosidaasia sen jälkeen, kun ne ovat ottaneet plasmidin, joka sisältää lisättyä DNA: ta, ja hajottaneet lacZ a -geenin. Nämä valkoiset pesäkkeet sisältävät rekombinantti bakteerit ja pitäisi valita (kuva 1).

Sisältävätkö kaikki valkoiset ja siniset pesäkkeet tällä tavalla plasmidin?

The siniset pesäkkeet sisältävät "itse" sidottu plasmidit että tehdä ei ole DNA -inserttejä, jotka keskeyttävät lac Z -geenin. Valkoiset pesäkkeet koostuvat bakteereista, jotka kantavat plasmidit joissa on DNA-inserttifragmentteja, jotka katkaisevat lac Z -geenin. Valinta tehdään ampisilliinilla sisältävät keskikokoinen.

Samoin mikä on sinivalkoisen seulonnan tarkoitus? The sininen – valkoinen näyttö on a seulonta tekniikka, joka mahdollistaa rekombinanttibakteerien nopean ja kätevän havaitsemisen vektoripohjaisissa molekyylikloonauskokeissa. Kiinnostava DNA ligatoidaan vektoriin.

Kun tämä otetaan huomioon, mikä on sinivalkoisten pesäkkeiden seulonta?

The sininen - valkoinen näyttö on seulonta tekniikka, joka mahdollistaa onnistuneiden ligaatioiden havaitsemisen vektoripohjaisessa geenikloonauksessa. Kiinnostava DNA ligatoidaan vektoriin. Jos ligaatio onnistui, bakteeri siirtomaa tulee olemaan valkoinen ; jos ei, niin siirtomaa tulee olemaan sininen.

Miksi jotkut pesäkkeet ovat sinisiä ja toiset valkoisia?

Minkä tahansa siirtomaa plasmidia sisältävä (ja siksi toimiva β-galaktosidaasigeeni) kääntyy sininen , β-galaktosidaasiaktiivisuuden tulos. Tätä kutsutaan α-komplementaatioksi. Insertti rikkoi β-galaktosidaasigeenin ja siksi nämä pesäkkeitä jäädä jäljelle valkoinen.

Suositeltava: