Mihin käänteistranskriptio-PCR:ää käytetään?
Mihin käänteistranskriptio-PCR:ää käytetään?

Video: Mihin käänteistranskriptio-PCR:ää käytetään?

Video: Mihin käänteistranskriptio-PCR:ää käytetään?
Video: RT-PCR made EASY - Reverese Transcriptase PCR for detection and test of Viral DNA 2024, Marraskuu
Anonim

RT - PCR ( Käänteistranskriptaasi PCR ) RT - PCR On käytetty tutkimuslaboratorioissa tutkimaan geenien ilmentymistä, esimerkiksi kokeissa, joilla erotetaan eksonit introneista, ja käytetty kliinisesti geneettisten sairauksien diagnosoimiseksi ja lääkehoidon seuraamiseksi.

Kun tämä otetaan huomioon, mitä käänteistranskriptioon tarvitaan?

Aloittaa käänteinen transkriptio , käänteinen transkriptaasit vaativat lyhyen DNA-oligonukleotidin, jota kutsutaan alukkeeksi, sitoutuakseen komplementaarisiin sekvensseihinsä RNA-templaatissa ja toimiakseen lähtökohtana uuden juosteen synteesille.

Lisäksi miksi on tärkeää käyttää cDNA:ta PCR:ään? cDNA on oma merkitys sisään Polymeraasiketjureaktio ( PCR ) tekniikkaa. cDNA on seurausta käänteiskopioijaentsyymeiksi kutsuttujen entsyymien käänteistranskriptiosta. Nyt, koska se on tarkka kopio genominen DNA , Tämä cDNA voi palvella tarkoitus mallista DNA in vitro -amplifikaatiota ja myöhempiä analyysejä varten.

Mitä eroa on tällä tavalla reaaliaikaisen PCR:n ja käänteistranskriptaasi-PCR:n välillä?

RT - PCR käytetään monistamaan DNA-koodin käänteinen transkriptio; QPCR mittaa vahvistuksen. 3. RT - PCR on monistusta varten, kun taas qPCR on kvantifiointia varten.

Onko cDNA kaksijuosteinen?

Toisin kuin RNA, DNA -molekyylit voidaan kloonata helposti (näitä kutsutaan cDNA kloonit) tekemällä cDNA kaksinkertainen - jumissa ja liitettiin vektori-DNA:han. DNA:n sekvenssianalyysi on paljon helpompaa kuin RNA:n, joten cDNA on olennainen muoto RNA:n, erityisesti eukaryoottisen mRNA:n, analyysissä.

Suositeltava: