Miten restriktioentsyymejä käytetään geelielektroforeesissa?
Miten restriktioentsyymejä käytetään geelielektroforeesissa?

Video: Miten restriktioentsyymejä käytetään geelielektroforeesissa?

Video: Miten restriktioentsyymejä käytetään geelielektroforeesissa?
Video: Geenin kloonaus bakteerissa (1) 2024, Saattaa
Anonim

1 vastaus. DNA:n, RNA:n tai plasmidin leikkaamiseen osoitteessa rajoitus kohtia (kuten EcoRI, BamHI, hindIII ja BglII) luomaan pienempiä geneettisiä fragmentteja, jotka voidaan erottaa ja siten karakterisoida käyttämällä geelielektroforeesi.

Samalla tavalla voidaan kysyä, mikä on restriktioentsyymien rooli?

A restriktioentsyymi on proteiini, joka tunnistaa spesifisen, lyhyen nukleotidisekvenssin ja katkaisee DNA:n vain kyseisestä kohdasta, joka tunnetaan nimellä rajoitus paikka tai kohdesekvenssi. Elävissä bakteereissa, restriktioentsyymit toimivat suojaamaan solua tunkeutuvia virusbakteriofageja vastaan.

Lisäksi, mistä tiedät mitä restriktioentsyymiä käyttää? Kun valitset restriktioentsyymejä, haluat valita entsyymejä, jotka:

  1. Reunusta välikappaletta, mutta älä leikkaa sisäosaa.
  2. Ovat halutussa paikassa vastaanottajaplasmidissasi (yleensä Multiple Cloning Site (MCS)), mutta älä leikkaa muualla plasmidissa.

Tämän lisäksi, miten restriktioentsyymejä käytetään tutkimuksessa?

Laboratoriossa, restriktioentsyymit (tai restriktioendonukleaasit ) ovat käytetty leikkaamaan DNA:ta pienemmiksi fragmenteiksi. Leikkaukset tehdään aina tietyissä nukleotidisekvensseissä. Eri restriktioentsyymit tunnistaa ja katkaista erilaisia DNA-sekvenssejä.

Mikä on geelielektroforeesin rooli?

Geelielektroforeesi on tekniikka, jota käytetään DNA-fragmenttien erottamiseen niiden koon mukaan. DNA-näytteet ladataan kuoppiin (syvennyksiin) toisessa päässä a geeli , ja sähkövirta viedään ne läpi geeli . DNA-fragmentit ovat negatiivisesti varautuneita, joten ne liikkuvat kohti positiivista elektrodia.

Suositeltava: