Miksi restriktioentsyymi ei leikkaa?
Miksi restriktioentsyymi ei leikkaa?

Video: Miksi restriktioentsyymi ei leikkaa?

Video: Miksi restriktioentsyymi ei leikkaa?
Video: РЕАЛЬНЫЙ ПРИЗРАК Раскрыта тайна страшного леса THIS PHOTO IS A REAL GHOST 2024, Marraskuu
Anonim

Voi olla useita eri syitä, miksi sinun restriktioentsyymi ei leikkaa DNA tässä videossa tarkasteltuna. Pilkottavan DNA:n valmistelu pitäisi ei saa sisältää epäpuhtauksia, kuten fenolia, kloroformia, alkoholia, EDTA:ta, pesuaineita tai liiallisia suoloja, jotka kaikki voivat häiritä restriktioentsyymi toiminta.

Miksi restriktioentsyymit eivät tässä suhteessa leikkaa bakteerien DNA:ta?

Bakteerit omistaa restriktioentsyymit , kutsutaan myös restriktioendonukleaasit , mikä leikata kaksijuosteinen DNA tietyissä kohdissa fragmenteiksi. Mielenkiintoista, restriktioentsyymit älä pilkko omiaan DNA . Bakteerit estää omansa DNA kaatopaikalta restriktioentsyymi metyloinnin kautta rajoitus sivustoja.

Voidaan myös kysyä, mistä restriktioentsyymit leikkaavat? Restriktioentsyymi Tyypit Yleensä tyyppi I entsyymit leikataan DNA paikoissa, jotka ovat kaukana tunnistussekvenssistä; Tyyppi II leikata DNA tunnistussekvenssin sisällä tai lähellä sitä; Tyyppi III leikata DNA:n lähellä olevat tunnistussekvenssit; ja tyyppi IV pilkkoo metyloitua DNA:ta.

Samoin kysytään, mitä tapahtuu, jos lisäät liikaa restriktioentsyymiä?

Epätäydellistä ruoansulatusta voi esiintyä kun liikaa tai liian vähän entsyymi käytetään. The epäpuhtauksien läsnäolo sisällä the DNA näyte voi estää entsyymejä , mikä myös johtaa epätäydelliseen ruoansulatukseen. Jonkin verran restriktioentsyymit vaativat kofaktoreita täydelle aktiivisuudelle.

Miksi rajoituskoosteeni ei toimi?

Epätäydellinen tai ei ruoansulatus DNA-metylaation estämän entsyymitoiminnan vuoksi. Jos entsyymi on aktiivinen ja sulattaa kontrolli DNA ja the reaktio asetetaan optimaalisissa olosuhteissa, mutta näet silti ongelmia kanssa ruoansulatus , se voi johtua siitä the entsyymi estyy metylaatiolla the templaatti-DNA.

Suositeltava: