Voitko sekvensoida PCR-tuotteen?
Voitko sekvensoida PCR-tuotteen?

Video: Voitko sekvensoida PCR-tuotteen?

Video: Voitko sekvensoida PCR-tuotteen?
Video: Thaimaa on auki tai ei! | Miksi monta pääsisääntöä! #livelovethailand 2024, Marraskuu
Anonim

Suoraan Jaksotus / PCR-tuotteet . Se on täysin mahdollista suoraan järjestys a PCR-tuote kloonaamatta ensin fragmenttia. Suoraan PCR-sekvensointi onnistuu harvoin, ellei sinä vie aikaa sen varmistamiseen sinä eivät putoa yksi monista ansoista.

Mitä tällä tavalla sekvensointi-PCR on?

Suoraan Jaksotus / PCR Tuotteet. Sinun on poistettava kaikki PCR alukkeet ja inkorporoimattomat nukleotidit ennen kuin tuote on sekvensoitu . Jaksotus käyttää vain yhtä aluketta kahden sijasta PCR . Jos et poista molempia alukkeita, saat kaksi sekvenssejä päällekkäin, jotka eivät ole luettavissa.

Samoin voinko käyttää PCR-alukkeita sekvensointiin? PCR-alukkeet on tarkoitettu PCR vahvistusta amplikonin saamiseksi. Sekvensointialukkeet ovat käytetty to järjestys DNA-fragmentin ja paljastaa sen DNA:n järjestys tunnistaa. 4. Kaksi PCR-alukkeet tarvitaan a PCR reaktio (yleensä); Vain yksi sekvensointialuke lisätään kohtaan a jaksotus reaktio.

Kun tämä pidetään mielessä, miten testaat PCR-tuotteita?

Havaitseminen ja analysointi PCR tuotteet . The tuote a PCR tulee olla määritellyn pituinen DNA-fragmentti tai -fragmentteja. Monia tekniikoita voidaan käyttää monistettujen sekvenssien havaitsemiseen (katso taulukko). Yksinkertaisin ja yleisesti käytetty tekniikka on elektroforeesi PCR-tuote agaroosigeelillä EtBr:lla (etidiumbromidi).

Miksi PCR-tuotteet on puhdistettava ennen sekvensointia?

Puhdistus DNA:ta a PCR reaktio on tyypillisesti tarpeellinen myöhempää käyttöä ja helpottaa entsyymien, nukleotidien, alukkeiden ja puskurikomponenttien poistamista.

Suositeltava: